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描(miáo)述:K360基因(yīn)擴(kuò)增儀(yí)具有特異(yì),敏(mǐn)感,產率(shuài)高, 快速(sù), 簡(jiǎn)便,重(zhòng)復性(xìng)好,易(yì)自動化等(děng)突出(chū)優點;能(néng)在一個(gè)試(shì)管內將所(suǒ)要(yào)研究的目(mù)的(dí)基(jī)因或某(mǒu)一(yī)DNA片段(duàn)於數(shù)小時內(nèi)擴(kuò)增至(zhì)十萬(wàn)乃至百萬倍,使肉眼(yǎn)能直(zhí)接(jiē)觀察和判(pàn)斷
詳細資(zī)料
K360基因(yīn)擴(kuò)增儀詳(xiáng)細(xì)介紹
基本(běn)原理類似於DNA的天然復(fù)製過程(chéng),其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)依(yī)賴於與靶序列兩端互補(bǔ)的(dí)寡核(hé)苷(gān)酸引物。PCR由變性(xìng)--退(tuì)火--延(yán)伸三(sān)個基本(běn)反應步驟構(gòu)成:
1,模板DNA的變性(xìng):模板DNA經加熱至(zhì)93℃左右一(yī)定時(shí)間(jiān)後,使模(mó)板(bǎn)DNA雙(shuāng)鏈或經(jīng)PCR擴增形成(chéng)的雙鏈DNA解離,使(shǐ)之成(chéng)為(wéi)單(dān)鏈,以便它與引(yǐn)物(wù)結合(hé),為(wéi)下(xià)輪反(fǎn)應作準備(bèi);
2,模板DNA與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的退火(復性(xìng)):模板DNA經加(jiā)熱變性(xìng)成(chéng)單鏈(liàn)後,溫度(dù)降(jiàng)至55℃左右,引(yǐn)物(wù)與模(mó)板DNA單鏈(liàn)的互(hù)補序(xù)列配(pèi)對(duì)結合(hé);
3,引(yǐn)物(wù)的(dí)延伸:DNA模板(bǎn)--引物(wù)結合物(wù)在TaqDNA聚合酶(méi)的作(zuò)用下(xià),以dNTP為反(fǎn)應原料,靶(bǎ)序(xù)列為(wéi)模(mó)板(bǎn),按(àn)鹼基配對(duì)與半保留復製(zhì)原理,合(hé)成(chéng)一條新的與(yǔ)模(mó)板DNA鏈互(hù)補(bǔ)的(dí)半保(bǎo)留復(fù)製(zhì)鏈重復(fù)循(xún)環變性--退(tuì)火--延(yán)伸三(sān)過程,就(jiù)可(kě)獲得(dé)更(gēng)多的(dí)“半(bàn)保留復製鏈(liàn)",而且這種新(xīn)鏈又可(kě)成(chéng)為下次循環的(dí)模板(bǎn)。每完(wán)成(chéng)一個(gè)循(xún)環(huán)需2~4分鐘(zhōng),2~3小(xiǎo)時就能將(jiāng)待(dài)擴目(mù)的基(jī)因(yīn)擴增放大幾百萬(wàn)倍(Plateau)。到(dào)達平台期所需循(xún)環(huán)次數(shù)取決於樣(yàng)品(pǐn)中模板的(dí)拷(kǎo)貝。
在(zài)此同(tóng)時(shí)認(rèn)識到蛋白(bái)質(zhì)是接受(shòu)RNA的遺傳(chuán)信息而(ér)合成的。50年(nián)代Zamecnik等(děng)在形(xíng)態(tài)學(xué)和分離(lí)的亞細(xì)胞(bāo)組分(fēn)實驗(yàn)中已發(fā)現(xiàn)微粒體(tǐ)(microsome)是(shì)細胞內(nèi)蛋白質合成的(dí)部位;1957年Hoagland,Zamecnik及Stephenson等分離出tRNA並(bìng)對它(tā)們(mén)在合(hé)成(chéng)蛋白(bái)質(zhì)中(zhōng)轉運(yùn)氨基(jī)酸的(dí)功能提(tí)出了假設;1961年Brenner及Gross等觀(guān)察了在(zài)蛋(dàn)白質(zhì)合(hé)成(chéng)過程(chéng)中mRNA與核糖體的(dí)結合(hé);1965年(nián)Holley測出了酵母(mǔ)tRNA的結(jié)構;特別是(shì)在60年代(dài)Nirenberg,Ochoa以(yǐ)及Khorana等(děng)幾組科(kē)學(xué)家的共(gòng)同努(nǔ)力破譯(yì)了(liǎo)RNA上編碼合成(chéng)蛋白質(zhì)的遺(yí)傳密(mì)碼(mǎ),隨(suí)後(hòu)研究(jiū)表明這套遺(yí)傳密(mì)碼在生(shēng)物界(jiè)具有通(tōng)用(yòng)性,從(cóng)而(ér)認(rèn)識了蛋白(bái)質翻譯合成的基本過程。
從(cóng)分(fēn)子生物學的發展(zhǎn)過程(chéng),可以看到(dào)在近(jìn)半(bàn)個世紀中它是生命科(kē)學範圍發展*為(wéi)迅速的一(yī)個(gè)前(qián)沿領域,推(tuī)動(dòng)著整個(gè)生命(mìng)科(kē)學(xué)的發(fā)展。至今(jīn)分(fēn)子(zǐ)生(shēng)物學(xué)仍在迅速發(fā)展(zhǎn)中,新(xīn)成(chéng)果,新(xīn)技術不(bù)斷(duàn)湧現(xiàn),但分子(zǐ)生物(wù)學(xué)的(dí)歷史(shǐ)還短,積(jī)累(léi)的(dí)資料還不夠。例如:在地球上千(qiān)姿(zī)萬(wàn)態的生物攜帶龐大(dà)的生命(mìng)信(xìn)息,迄今人類(lèi)所了解的隻是(shì)極(jí)少的(dí)一部(bù)分(fēn),還未(wèi)認識(shí)核酸(suān),蛋白質(zhì)組成生(shēng)命的(dí)許多基(jī)本(běn)規(guī)律;又如即使到2005年我(wǒ)們(mén)已經獲得人(rén)類基(jī)因(yīn)組DNA3×109bp的(dí)全序列,確(què)定了(liǎo)人(rén)的(dí)5-10萬(wàn)個基(jī)因的(dí)結(jié)構(gòu),但(dàn)是要(yào)搞(gǎo)清(qīng)楚這(zhè)些基因產物的功能(néng),調控,基(jī)因間的相(xiāng)互(hù)關係和協調,要理解80%以上不為(wéi)蛋白質(zhì)編(biān)碼(mǎ)的序列(liè)的作(zuò)用等等(děng),都(dū)還(huán)要經(jīng)歷漫(màn)長的研究道路(lù)。可以說(shuō)分子生物(wù)學的發(fā)展(zhǎn)前(qián)景(jǐng)光(guāng)輝燦爛,道路還會艱難曲折(zhē)。
平或(huò)放大真(zhēn)核(hé)細胞單拷(kǎo)貝(bèi)基(jī)因(yīn),通過(guò)PCR方法都是不難完(wán)成的。
4,特異性強 作為引物的(dí)寡核苷(gān)酸(suān)與(yǔ)模板結合(hé)的正確性(xìng)是決定(dìng)反(fǎn)應產物(wù)是否(fǒu)特異的關鍵(jiàn)。
5,對原(yuán)始材料(liào)質量要求(qiú)低含(hán)微(wēi)量(pg,ng)的(dí)目的DNA的粗製品(pǐn)或者總(zǒng)RNA,就可(kě)以用做反(fǎn)應(yīng)起始材(cái)料來獲取(qǔ)目的產(chǎn)物。
主(zhǔ)要(yào)適(shì)用(yòng)於生命(mìng)科(kē)學(xué),醫學,農業科學,環境(jìng)科(kē)學(xué),考古(gǔ)學及歷(lì)史事件(jiàn)解(jiě)讀(dú)和衛生安全方(fāng)麵。
K360基(jī)因(yīn)擴增儀(yí)技術參數
| 樣本容量 | 36×0.5ml |
| 模(mó)塊工作(zuò)溫(wēn)度(dù)範圍(wéi) | 0℃-99℃(室溫≤30℃) |
| 升溫速率 | ≥2.8℃/s |
| 降溫速率 | ≥2.5℃/s |
| 溫度均(jūn)一性(xìng) | ≤± 0.3℃(20℃-75℃) |
| 溫(wēn)度精(jīng)確性 | ≤0.1℃ |
| 溫度(dù)波動(dòng)度(dù) | ≤0.1℃ |
| *大循環數 | 99 |
| 耗(hào)能(*大輸入功率 | 350W |
| 外形(xíng)尺寸(長(cháng)×寬(kuān)×高(gāo)) | 370mm×249mm×180mm |
| 重(zhòng)量 | 4.8kg |
手(shǒu)機(jī)
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