蛋白(bái)質是生命體內最重要(yào)的(dí)生(shēng)物大(dà)分子(zǐ)之一(yī),廣泛存在於細胞(bāo)的各個結(jié)構(gòu)中(zhōng),參(cān)與幾(jī)乎(hū)所(suǒ)有(yǒu)的生物(wù)過程(chéng)。蛋白質的功能不僅與(yǔ)其(qí)氨基酸序列有關,還(huán)與其空間結構,修飾狀態密切相關(guān)。蛋白質的含量測定(dìng)在(zài)生物醫學研(yán)究(jiū),食品科學(xué),環境檢(jiǎn)測等(děng)領域有(yǒu)著(zhuó)重要(yào)的(dí)意義(yì)。蛋(dàn)白質測定儀作為測定樣品中蛋(dàn)白質(zhì)含量的(dí)重要(yào)儀(yí)器,廣泛(fàn)應用(yòng)於各(gè)類科研,工業及(jí)醫療(liáo)檢(jiǎn)測(cè)中。

1.比色法(fǎ):比色法是常用(yòng)的蛋(dàn)白(bái)質(zhì)測定方法(fǎ)之一。其(qí)原(yuán)理(lǐ)是(shì)利用蛋白(bái)質與(yǔ)特定化學(xué)試劑(jì)反應後,形成(chéng)有色化(huà)合(hé)物。通(tōng)過測量(liáng)反(fǎn)應產(chǎn)物(wù)的吸光度(dù),可以根(gēn)據標準曲綫計(jì)算出樣(yàng)品中(zhōng)的(dí)蛋白質濃(nóng)度(dù)。例(lì)如,BCA法(fǎ)和Lowry法是常見的(dí)比色(sè)法(fǎ)測定方法。BCA法(fǎ)利(lì)用(yòng)BCA試劑與蛋白(bái)質中的(dí)肽鍵反應,產(chǎn)生紫(zǐ)色(sè)的復合物;Lowry法(fǎ)則是利用酚(fēn)類試(shì)劑與(yǔ)蛋(dàn)白質反應(yīng)形成(chéng)藍(lán)色復(fù)合物。
2.紫外(wài)吸(xī)收(shōu)法:紫外吸收法是(shì)基於蛋白質在紫外(wài)光(guāng)區(qū)域(yù)(通常在280nm處(chǔ))有特定(dìng)的(dí)吸(xī)收(shōu)峰。大多數(shù)蛋(dàn)白質分子中(zhōng)都含(hán)有芳(fāng)香族氨(ān)基(jī)酸(suān)(如(rú)酪(lào)氨(ān)酸和色氨(ān)酸),這(zhè)些氨(ān)基酸(suān)在(zài)紫(zǐ)外光的照射下會發(fā)生吸(xī)收。通過測量(liáng)樣品在280nm處的吸光(guāng)度(dù),可以估算(suàn)蛋白(bái)質(zhì)的(dí)含量。紫外(wài)吸收(shōu)法的優點是(shì)無需(xū)加(jiā)入化(huà)學試劑,但其準(zhǔn)確性受樣(yàng)品(pǐn)中其他雜(zá)質的影響較(jiào)大(dà)。
3.光散射(shè)法(fǎ):光(guāng)散射法是通過(guò)測量蛋(dàn)白質(zhì)分(fēn)子散射(shè)光的強度(dù)來計算蛋白(bái)質濃度(dù)。蛋白(bái)質的光散射(shè)特(tè)性(xìng)受(shòu)分子大(dà)小(xiǎo)和形狀(zhuàng)的影(yǐng)響(xiǎng),因(yīn)此該方(fāng)法通(tōng)常(cháng)用(yòng)於大分子蛋(dàn)白質的(dí)定(dìng)量分(fēn)析。這種(zhǒng)方(fāng)法應用(yòng)較少,且設(shè)備成(chéng)本較高(gāo)。
蛋(dàn)白質(zhì)測定儀(yí)的優點:
1.高靈(líng)敏度(dù):能夠(gòu)檢測微(wēi)量蛋白質,適合(hé)不同濃度範圍的(dí)樣(yàng)品。
2.快(kuài)速便(biàn)捷(jié):操作(zuò)簡便(biàn),能夠快速獲(huò)得(dé)結果,尤(yóu)其是微(wēi)孔(kǒng)板讀數儀(yí)可以實(shí)現(xiàn)高通量(liáng)的檢測。
3.廣泛(fàn)適(shì)用:可用於液體樣(yàng)品(pǐn),細胞培養(yǎng)液,血(xiě)清(qīng),尿液(yè)等(děng)多種樣品的蛋白(bái)質含(hán)量分(fēn)析。
4.準(zhǔn)確性高:普(pǔ)遍具有較高(gāo)的準(zhǔn)確(què)度,適(shì)用(yòng)於(yú)嚴格的實驗要求。